高通量蛋白质组学分析
SILAC定量蛋白质组学分析
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Stable isotope labelling using amino acids in cell culture (SILAC),即细胞培养条件下的稳定同位素标记法,利用天然同位素(轻型,light)或稳定的同位素标记(重型,heavy)的必需氨基酸取代细胞培养基中的对应氨基酸,经过>6个倍增周期后,稳定同位素标记的氨基酸将完全参入细胞新合成的蛋白质中。不同标记细胞的裂解蛋白按照细胞数或蛋白量等比例混合,经纯化,分离后进行质谱鉴定,从而实现相对定量。



与体外化学标记相比,SILAC具有以下优势:

体内标记技术,标记效率高;

活体标记,更接近样品真实状态

SILAC不足:

操作复杂,实验周期长,成本较高


应用方向:

药物作用靶点研究;

疾病标志物筛选;

作用机制研究





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