高通量蛋白质组学分析
磷酸化修饰
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蛋白质的磷酸化修饰(Phosphorylation modification),通常是指在酶的催化作用下,将ATP的磷酸根基团,转移到蛋白的氨基酸侧链上,ATP随之变为ADP。该过程通常是可逆的,催化磷酸化修饰发生的酶,被称为激酶(kinase),去除蛋白磷酸化修饰的酶,被称为磷酸酶(phosphatase)。磷酸化修饰被称为蛋白质的功能“开关”,可以借此调控蛋白的活性。磷酸化修饰是目前已知分布最为广泛的翻译后修饰,几乎参与、调解着包括细胞增殖,发育,分化,细胞骨架调控,细胞凋亡,神经活动,肌肉收缩,新陈代谢,肿瘤发生等生命活动的所有过程,其重要性不言而喻。



TiO2是最常用、发展最成熟的富集磷酸化蛋白/肽段的一种方法。在酸性条件下,TiO2表面带正电,可以与磷酸化肽发生静电作用而达到吸附的目的。样品经酶解后,用TiO2微球对磷酸化肽段进行富集,富集后的产物由高精度质谱分析,并通过专业软件完成数据检索。另外,TiO2富集结合TMT/iTRAQ标记,还可以进行定量磷酸化蛋白质组分析。



应用方向:

广泛运用在信号转导通路、细胞凋亡、发育分化、癌症机理等研究领域。


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